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昆虫细胞表达产品
昆虫稳定表达系统概述
昆虫稳定表达系统兼具杆状病毒和哺乳动物表达系统的优点。昆虫稳定表达系统使用简便,方法直接,其转染和选择方法与哺乳动物表达系统类似。同时,利用昆虫稳定表达系统往往可以获得比哺乳动物表达系统更高的表达水平,特别适合分泌型蛋白的生产。与杆状病毒表达系统类似,利用昆虫稳定表达系统可以获得很高的表达水平。该系统另一个优点是可以获得可靠、可重复的表达水平。而杆状病毒表达系统则并非如此,其表达水平在各次实验中并不一致。获得稳定的细胞系后,其表达水平可长期维持。此外,昆虫稳定表达系统利用正常的对数生长期细胞生产蛋白质,因而可以获得优质的蛋白质。
InsectSelect™ 系统是一种稳定的昆虫表达系统,适用于 Sf9、Sf21或 High Five™ 细胞的连续、非裂解表达。利用 InsectSelect™ 系统只需以下三个简单的步骤即可获得稳定的表达效果:
1. 将感兴趣的基因克隆到 InsectSelect™ 载体中。
2. 转染昆虫细胞。
3. 选择稳定克隆。InsectSelect™ 系统利用杀稻瘟菌素或 Zeocin™
选择系统进行稳定克隆的高效选择。使用杀稻瘟菌素时,最短可在一周时间内确定克隆。蛋白质产量一般取决于基因的性质。预期产量可达 1-10 μg/ml,但不能确保每次实验均达到此产量。
杆状病毒表达系统概述
昆虫细胞表达系统具有明显的优点,例如:表达水平高、规模易于放大、生产的蛋白质带有翻译后修饰而且细胞生长条件简单。昆虫细胞的生长不需要 CO2,可方便地转换为高密度悬浮培养,从而用于大规模的蛋白质表达。哺乳动物系统的许多翻译后修饰通路在昆虫细胞中也存在,因此可以生产与天然哺乳动物蛋白的抗原性、免疫原性和功能相似的重组蛋白。杆状病毒表达系统功能强大、用途多样,可用于昆虫细胞中重组蛋白的高水平表达。据报道,利用杆状病毒表达系统可以获得高达 500 mg/L 的表达水平,因此这是一种理想的高水平表达系统。
BaculoDirect™ 杆状病毒表达系统是目前快速、简单的重组杆状病毒生产方法。利用该系统在不使用噬斑纯化技术的情况下,一周时间内即可分离出纯化病毒。蛋白质产量一般取决于基因的性质。预期产量可达 25-250 μg/ml,但不能确保每次实验均达到此产量。BaculoDirect™ 线性 DNA 中含有 attR 位点,可通过 Gateway入门克隆进行快速、高效的重组克隆。以此获得的重组 DNA 可从 LR反应混合物中直接提取,用于转染昆虫细胞,节省大量的时间。在一周时间内即可分离出纯化病毒。BaculoDirect™ 系统可减少手工操作时间,因而是理想的高通量表达系统。
Bac-to-Bac® 杆状病毒表达系统采用独特的杆状病毒穿梭载体,该载体通过位点特异性转位与表达框重组,形成杆状病毒表达质粒。随后,将杆状病毒表达质粒转染到昆虫细胞内,形成重组杆状病毒。利用简单的蓝白斑筛选法可从大肠杆菌中筛选出阳性杆状病毒表达质粒。质粒确认后,即可转入昆虫细胞中,形成重组杆状病毒。无需使用繁琐冗长的噬斑纯化技术。
Bac-N-Blue™ 杆状病毒表达系统在高水平重组蛋白生产中的应用已有十余年的时间。该系统采用经过改进的 AcMNPV DNA、具有更高表达能力的细胞系和小型载体,因而生产更快,使用更方便。

Sf-900™ III SFM
Sf-900™ III SFM 是一种非动物源性的无蛋白培养基,可以获得可靠一致的细胞生长和蛋白质表达效果。该产品配方中水解物含量为Sf-900™ ll 的三分之一。由于该培养基不含动物源性成分,因此可减少外来物质筛查的工作。
• 非动物源性培养基,可改善昆虫细胞培养的一致性
• 适用于杆状病毒和昆虫稳定表达系统,可支持和提高悬浮培养的 Sf9 和 Sf21 细胞的生长以及重组蛋白的表达
• 支持 Sf9 细胞生长,最高密度可达 10-14 × 106 个细胞/ml
• 无蛋白、低水解物配方,可改善批次间的一致性和可靠性
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。正确储存时可稳定保存12 个月。

Sf-900™ II SFM
Sf-900™ II SFM 是一种无蛋白的昆虫细胞培养基,适合草地贪夜蛾(Sf9 和 Sf21) 细胞的生长和维持以及杆状病毒表达载体系统 (BEVS)中重组蛋白的大规模生产。该培养基适用于悬浮和单层培养,也可支持其他鳞翅目昆虫细胞系的生长。
说明:Sf-900™ II SFM 主文件已提交至 FDA。要引用该主文件,可与 Invitrogen 公司技术支持部门或者您当地的销售代表联系,获得许可。

Sf-900™ II SFM (1X),液体
通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。

Sf-900™ II SFM (1X),液体 (不含甲硫氨酸和胱氨酸)
通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。

Sf-900™ 培养基 (1.3X),液体
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。

Schneider 果蝇细胞培养基 (1X),液体
经过改进并通过昆虫细胞培养检测
建议储存条件:2°C 至 8°C 下储存。

Express Five® SFM (1X),液体
Express FiveR SFM 是一种无蛋白的昆虫细胞培养基,用于 BTI-TN-5B1-4 (High Five™) 粉纹夜蛾 (Trichoplusia ni) 细胞系时,可使细胞获得优良的生长性能,并使杆状病毒表达载体系统 (BEVS) 获得最高的重组基因表达水平。使用这种独特的培养基可以避免 High Five™细胞系培养时的一些问题。该培养基适合单层和悬浮型无血清培养,可促进昆虫细胞生长,密度可超过 5 × 106 个细胞/ml,群体倍增时间为 16 至 30 小时。其重组蛋白表达水平等于或高于使用其他无血清配方时的水平。为了提高稳定性,该配方不含 L-谷氨酰胺。使用前应向每 500 ml 培养基中加入 45 ml 200 mM 的 L-谷氨酰胺。通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。

Grace 昆虫细胞培养基,含添加剂 (1X),液体
通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。

Grace 昆虫细胞培养基,含添加剂 (2X),液体
通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。

Grace 昆虫细胞培养基,不含添加剂 (1X),液体
通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。

IPL-41 昆虫细胞培养基 (1X),液体
通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。

定制式昆虫细胞培养基产品
我们将为您定制最适合您体系需求的昆虫细胞表达产品配方。请与我们的定制产品服务组联系,他们会帮助您选择最符合您需求的产品和包装。请注意,Sf900™ II 无血清培养基适用于采用除 Sf9 和 Sf21 之外的细胞系的昆虫细胞培养系统。

昆虫细胞培养基添加剂

4% 琼脂糖凝胶
建议储存条件:2°C 至 8°C 下储存。

化学成分确定的脂质浓缩物

化学成分确定的脂质浓缩物是一种浓缩的脂质乳剂,用于减少或者替代细胞培养基中的胎牛血清,用途广泛,例如:CHO、杂交瘤和昆虫细胞培养的生长和维持;利用杂交瘤细胞生产单克隆抗体;以及利用昆虫细胞进行病毒表达。该培养基添加剂组分均具有明确的化学成分。
通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:2°C 至 8°C 下避光储存。
注意:该物质属有害物质。所有人员操作该产品前均需阅读材料安全数据表。

Pluronic® F-68, 10% (100X)
其以蒸馏水配制。
通过昆虫细胞培养检测。
建议储存条件:15°C 至 30°C 下储存。
PluronicR 是 BASF 公司的注册商标。

酵母自溶液超滤液 (50X),液体
酵母自溶液超滤液可与 IPL-41 昆虫细胞培养基配合使用,适于草地贪夜蛾 (Sf9) 细胞的生长。由 200 g/L 酵母自溶液和蒸馏水配制而成。
通过昆虫细胞培养检测。
性能测试:通过 Sf9 细胞生长试验性能测试。

Cellfectin® 试剂
CellfectinR 试剂产品经过测试,可使昆虫细胞获得最佳的转染效果。对于杆状病毒表达系统或者昆虫稳定表达质粒,使用 CellfectinR 试剂可使 S2、Sf9、Sf21 和 High Five™ 细胞获得高效、一致的转染效果。
建议储存条件:4°C 下储存。正确储存时可稳定储存 6 个月。

 

 
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